Keskeinen ero - HPLC vs. HPTLC
Keskeinen ero HPLC: n ja HPTLC: n välillä on, että HPLC sallii komponenttien kvantitatiivisen erottamisen näytteessä, kun taas HPTLC ei salli komponenttien kvantitatiivista erottamista näytteessä.
Kromatografia on fysikaalinen erotusmenetelmä, jota käytetään seoksen komponenttien erottamiseen ja tunnistamiseen. Sekä HPLC että HPTLC ovat kromatografiatekniikoita. HPLC on korkean suorituskyvyn nestekromatografia. HPTLC on korkean suorituskyvyn ohutkerroskromatografia.
SISÄLLYS
1. Yleiskatsaus ja keskeinen ero
2. Mikä on HPLC
3. Mikä on HPTLC
4. Vertailu rinnakkain - HPLC vs. HPTLC taulukkomuodossa
5. Yhteenveto
Mikä on HPLC?
HPLC on korkean suorituskyvyn nestekromatografia. Se on analyyttinen tekniikka, jota käytetään seosten komponenttien erottamiseen, tunnistamiseen ja kvantifiointiin. Tässä tekniikassa näyte liuotetaan sopivaan liuottimeen. Sitten liuotin näytteen kanssa johdetaan pumpun läpi annetulla paineella. Pumppu on täytetty kiinteällä adsorboivalla materiaalilla. Sitten jotkut komponentit sitoutuvat voimakkaasti imukykyiseen materiaaliin, kun taas muut komponentit sitoutuvat löyhästi. Tämä aiheuttaa komponenteille erilaiset virtausnopeudet pumpun läpi. Siksi komponentit voidaan erottaa helposti.
Kuva 01: HPLC-järjestelmä
Adsorbenttimateriaali, joka täyttää pumpun, tunnetaan kiinteänä vaiheena. Liuotin, jossa on liuennut näyte, tunnetaan liikkuvana faasina. Tässä tekniikassa käytettyä pumppua kutsutaan kolonniksi. Pylväs on täytetty adsorboivalla materiaalilla, yleisimmin piidioksidihiukkasilla. Näiden hiukkasten koko voi vaihdella välillä 2-50 μm. Erotusprosessiin vaikuttaa liikkuvan faasin koostumus ja järjestelmän lämpötila. Kiinteän faasin ja näytteessä olevan komponentin väliset vuorovaikutukset voivat olla hydrofobisia vuorovaikutuksia, dipoli-dipoli-vuorovaikutuksia, ionisidoksia jne.
HPLC: n toimintapaine on huomattavasti korkeampi kuin perinteisessä nestekromatografiassa. Se on noin 50-350 baaria. Ero nestekromatografian ja HPLC: n välillä on se, että nestekromatografiassa näyte putoaa pylvään läpi painovoiman alaisena, kun taas HPLC: ssä näyte paineistetaan kolonnin läpi. Pylvään koko ja absorboivat hiukkaset ovat myös hyvin pieniä verrattuna perinteiseen nestekromatografiaan. HPLC-tekniikan antama resoluutio on kuitenkin parempi.
Mikä on HPTLC?
HPTLC on korkean suorituskyvyn ohutkerroskromatografia. Se on perinteisen TLC: n kehittynyt ja automatisoitu muoto. Tämä tekniikka tarjoaa tehokkaan resoluution lyhyellä aikavälillä. Tässä analyysimenetelmässä näyte ja viite voidaan analysoida samanaikaisesti, mikä mahdollistaa näytteen vertaamisen vertailuun. Se antaa paremman analyyttisen tarkkuuden kuin muut kromatografiset tekniikat. Analyysiin kuluva aika on lyhyempi. Tekniikka on edullinen tekniikka.
Kuva 02: Elintarvikevärien analyysi HPTLC: n avulla
HPTLC-menetelmä on yksinkertainen prosessi, ja myös näytteen valmistusvaihe eliminoidaan (perinteisessä TLC: ssä näytteen valmistusvaihe sisältyy ennen erottamista. Tähän vaiheeseen sisältyy puhdistus ja rikastus). Liuotinta voidaan käyttää suoraan ilman esikäsittelyä, vaikka muut kromatografiset tekniikat vaativat esikäsittelyjä, kuten kaasunpoisto, suodatus jne.
HPTLC: ssä käytetty adsorbenttimateriaali on piidioksidia, jolla on hyvin pienet hiukkaskoot. Perinteisessä TLC: ssä piidioksidin hiukkaskoko on 5-20 μm, kun taas HPTLC: ssä se on 4-8 μm. Näyte levitetään HPTLC-levylle applikaattoria käyttäen. Se antaa yhtenäisen ja turvallisen käytön. Sitten levyt sijoitetaan kammioon, jossa on liikkuva faasi. Kammion tulisi olla kyllästetty liikkuvan faasin höyryllä. HPTLC-prosessin jälkeen liikkuvat paikat voidaan havaita. Levyn täpliä havaittaessa HPTLC-tekniikassa käytetään sopivaa UV-aluetta tai jodikammiota.
Mikä on ero HPLC: n ja HPTLC: n välillä?
Erilainen artikkeli keskellä taulukkoa
HPLC vs. HPTLC |
|
| HPLC on korkean suorituskyvyn nestekromatografia. | HPTLC on korkean suorituskyvyn ohutkerroskromatografia. |
| Tekniikka | |
| HPLC: ssä liikkuva faasi liuottimen kanssa johdetaan kolonnilla, joka on täytetty kiinteällä faasilla. | HPTLC: ssä näyte tarkkaillaan TLC-levyllä ja se asetetaan liikkuvan faasin sisältävän kammion sisään; sitten näytteen annetaan liikkua ylöspäin levyä liikkuvan faasin mukana. |
| Mittaus | |
| HPLC: ssä komponenttien virtausnopeuksien eroja pylvään läpi käytetään näytteen komponenttien erottamiseen. | HPTLC: ssä näytteessä olevien komponenttien kulkemien etäisyyksien eroja käytetään näytteen komponenttien erottamiseen. |
| Kvantitatiivinen erotus | |
| HPLC sallii näytteen komponenttien kvantitatiivisen erottamisen. | HPTLC ei salli komponenttien kvantitatiivista erottamista näytteessä. |
Yhteenveto - HPLC vs. HPTLC
HPLC ja HPTLC ovat kaksi kromatografiatekniikkaa. Keskeinen ero HPLC: n ja HPTLC: n välillä on, että HPLC sallii komponenttien kvantitatiivisen erottamisen näytteessä, kun taas HPTLC ei salli komponenttien kvantitatiivista erottamista näytteessä.
