Tärkein ero - Transformantit vs. rekombinantit
Rekombinaatio ja transformaatio ovat kaksi ratkaisevaa vaihetta geenitekniikassa, jossa organismin ominaisuuksia muunnetaan tarkoituksellisesti manipuloimalla sen geenimateriaalia. Rekombinaatio on prosessi, jossa vieras DNA sisällytetään vektorigenomiin ja muodostuu rekombinantti-DNA-molekyyli. Transformaatio on seuraava vaihe, jossa rekombinanttimolekyyli viedään isäntäorganismiin. Isäntäsolu tai organismi helpottaa rekombinanttimolekyylin ilmentymistä. Keskeinen ero transformanttien ja rekombinanttien välillä on se, että transformantit ovat soluja tai organismeja, jotka ottavat rekombinanttimolekyylin sisälle ja helpottavat ilmentymistä, kun taas rekombinantit ovat vektoreita, jotka mahdollistavat vieraan DNA: n insertoinnin sen genomiin ja kuljetuksen isäntätransformanteihin ekspressiota varten.
SISÄLLYSLUETTELO
1. Yleiskatsaus ja keskeinen ero
2. Mitä ovat transformantit
3. Mitä ovat rekombinantit
4. Vertailu vierekkäin - Transformantit vs. rekombinantit
5. Yhteenveto
Mitä ovat transformantit?
Transformantit ovat soluja tai organismeja, joissa rekombinantti-DNA otetaan ekspressiota varten. Bakteereja käytetään yleisesti isäntänä organismeina geenitekniikassa, koska niitä on helppo kasvattaa, lisääntyä ja käsitellä laboratorio-olosuhteissa ja transformaatio on helppoa muihin organismeihin verrattuna. Geenitekniikassa suosituin isäntäbakteeri on bakteeri E coli.
Transformaatioprosessin aikana isäntäsolut indusoidaan ottamaan rekombinantit. Jotkut isäntäsolut eivät kuitenkaan ota rekombinanttimolekyylejä. Ne tunnetaan ei-transformantteina ja solut, jotka sisältävät rekombinantti-DNA-molekyylejä sisällä, tunnetaan transformanteina. Transformanttien valinta ei-transformanteista tapahtuu käyttämällä molekyylibiologian valittavia markkereita. Valittavat markkerit insertoidaan vektorigenomiin yhdessä DNA-insertin kanssa. Yleisesti käytetyt valittavat markkerit ovat antibiooteille resistenttejä geenejä. Markkerigeenit helpottavat transformanttien erilaistumista ja jatkavat prosessia. Transformointiprosessin jälkeen bakteeria kasvatetaan antibiootteja sisältävässä väliaineessa. Vain transformantit pystyvät kasvamaan tällä väliaineella, koska niillä on rekombinantit sisällä.
Kun rekombinantti-DNA-molekyyli on transformoitu isäntäorganismin sisällä, vieras DNA voidaan joko integroida isäntäsolun genomiin tai pysyä integroimattomana sytoplasmassa. Vieraan DNA: n ilmentyminen ja replikaatio tapahtuvat kuitenkin isäntäorganismissa ja tuottavat halutun tuloksen prosessista.
Mitä ovat rekombinantit?
Rekombinantti on organismi tai solu, jolla on rekombinoitua genomia, joka sisältää vierasta DNA: ta. Rekombinantit ovat seurausta geenitekniikan prosessista. Ne rakennetaan keinotekoisesti in vitro lisäämällä mielenkiintoisia geenejä ja modifioimalla genomia. Usein bakteeriplasmidit ja bakteriofaagit toimivat rekombinantteina geenitekniikassa. Siinä on kimeeri eri DNA: ta. Rekombinantti-DNA-molekyyli kuljettaa vieraan DNA: n isäntäorganismiin ja saa sen ekspressoimaan ja muodostamaan halutun tuotteen.
Rekombinanttimolekyylit rakennetaan käyttämällä restriktioendonukleaaseja ja DNA-ligaaseja. Haluttu DNA-fragmentti erotetaan alkuperäisestä organismista ja insertoidaan vektoriin rekombinantin tekemiseksi transformaatiota varten. Kiinnostuksen kohteena olevan geenin leikkaaminen ja vektori-organismin avaaminen tulisi tehdä samalla restriktioentsyymillä yhteensopivien tahmojen päiden muodostamiseksi niiden liittämiseksi toisiinsa. Kun vieras DNA on sisällytetty vektorigenomiin, se tunnetaan rekombinanttina tai yhdistelmä-DNA-molekyylinä.
Kuva 02: Rekombinantti-DNA
Mitä eroa on transformanttien ja rekombinanttien välillä?
Erilainen artikkeli keskellä taulukkoa
Transformantit vs. rekombinantit |
|
| Transformantit ovat soluja, joissa on yhdistelmä-DNA-molekyyli sisällä. | Rekombinantit ovat kantajamolekyylejä, joiden vieras DNA on insertoitu omaan genomiinsa. |
| Vieraan DNA: n ilmentyminen | |
| Ne ovat isäntäsoluja, jotka kykenevät ilmentämään rekombinantti-DNA: ta. | Heidän pitäisi pystyä replikoitumaan isäntäorganismissa. |
| Valinta | |
| Solut, joita voidaan helposti kasvattaa ja lisääntyä, valitaan isäntäsoluiksi. | Niiden on oltava helposti uutettavissa ja niiden tulisi sisältää valittavia markkereita. |
Yhteenveto - Transformantit vs. rekombinantit
Transformantit ovat soluja tai organismeja, joissa on yhdistelmä-DNA-molekyylejä. Rekombinantit ovat organismeja tai soluja, joille on tehty geneettinen rekombinaatio ja joiden genomeissa on vieras DNA. Bakteerisoluja käytetään usein isäntäsoluina transformaatioon ja plasmideja ja bakteriofageja käytetään usein vektoreina rekombinantti-DNA-tekniikassa. Tämä on ero transformanttien ja rekombinanttien välillä.
