Tärkein ero - Taq-polymeraasi vs. DNA-polymeraasi
DNA-polymeraasi on entsyymi, joka luo uuden DNA: n rakennuspalikoistaan (nukleotideista). Prokaryooteista ja eukaryooteista löytyy erityyppisiä DNA-polymeraaseja. DNA: n päällekkäisyys on mahdollista näiden erityisten entsyymien läsnäolon vuoksi, ja geneettinen tieto välitetään jälkeläisille DNA-polymeraasien vaikutuksesta. Taq-polymeraasi on erityistyyppinen DNA-polymeraasi, joka on lämpöstabiili ja jota käytetään laajalti PCR: ssä. Taq-polymeraasia löytyy termofiilisistä bakteereista ja se puhdistetaan in vitro DNA-replikaatiossa. Keskeinen ero Taq-polymeraasin ja DNA-polymeraasin välillä on se, että Taq-polymeraasi kestää korkeita lämpötiloja ilman denaturointia, kun taas muut DNA-polymeraasit denaturoituvat korkeissa lämpötiloissa (proteiineja hajoavissa lämpötiloissa).
SISÄLLYSLUETTELO
1. Yleiskatsaus ja keskeinen ero
2. Mikä on Taq-polymeraasi
3. Mikä on DNA-polymeraasi
4. Vertailu vierekkäin - Taq-polymeraasi vs. DNA-polymeraasi
5. Yhteenveto
Mikä on Taq Polymerase?
Taq-polymeraasi (Taq-DNA-polymeraasi) on entsyymi, jota käytetään syntetisoimaan DNA in vitro PCR-tekniikalla. Sitä tuottaa termofiilinen bakteeri nimeltään Thermus aquaticus, joka elää kuumissa lähteissä ja lämpöaukoissa. Taq-polymeraasi on termostabiili entsyymi, joka ei hajoa korkeissa lämpötiloissa. Taq-polymeraasi puhdistettiin ensimmäistä kertaa ja julkaistiin julkaisussa Chien et ai. PCR-tekniikka suoritetaan Taq-polymeraasin avulla, koska se kykenee sietämään korkeita lämpötilan ja lämpötilan vaihteluja PCR: n aikana. Taq-polymeraasi katalysoi DNA-synteesiä, kun alukkeita, nukleotideja ja yksijuosteista templaatti-DNA: ta on. Entsyymi koostuu yhdestä polypeptidistä, jonka molekyylipaino on noin 94 kDa. Taq-polymeraasi osoittaa optimaalisen aktiivisuutensa 80 ° C: ssa ja pH-alueella 7 - 8 magnesiumionien läsnä ollessa. Sillä on sekä polymeraasi- että eksonukleaasiaktiivisuutta. Entsyymi koostuu yhdestä polypeptidiketjusta ja Taq-polymeraasin geeni sisältää suuren G- ja C-pitoisuuden (67,9%).
Termostabiili Taq-polymeraasi mahdollistaa PCR: n suorittamisen korkeissa lämpötiloissa, jotka lisäävät alukkeiden spesifisyyttä ja vähentävät ei-toivottujen PCR-tuotteiden (alukedimeerit) tuottamista. Taq-polymeraasi eliminoi myös tarpeen lisätä uusia entsyymejä PCR-reaktioon jokaisen PCR-reaktiosyklin jälkeen, koska se kykenee kestämään korkeita lämpötiloja. Taq-polymeraasin löytäminen mahdollisti PCR: n suorittamisen yhdessä suljetussa putkessa suhteellisen yksinkertaisessa koneessa. Näiden Taq-polymeraasin ominaisuuksien vuoksi PCR: stä tulee suosittu rutiininomaisesti suoritettu laboratoriotekniikka monissa DNA-analyysejä koskevissa molekyylibiologisissa analyyseissä.
Taq-polymeraasia käytetään laajalti molekyylibiologisissa tekniikoissa, ja tarvitaan laajamittaista Taq-polymeraasituotantoa. Siksi Taq-DNA-polymeraasia koodaava geeni rekombinantti-DNA-tekniikkaa ja geenikloonausta käyttäen oli kloonattu ja ilmentynyt Escherichia colissa. Tämä on helpottanut suuresti rekombinantin Taq-polymeraasin tuotantoa ja laskenut tämän entsyymin hintaa riittävälle käytölle.
Kuva 1: Taq-polymeraasi
Mikä on DNA-polymeraasi?
DNA-polymeraasi on entsyymi, joka katalysoi DNA: n synteesiä nukleotideista. Se on tarkin entsyymi, joka on vastuussa genomien monistamisesta ja geneettisen tiedon välittämisestä jälkeläisille. Solunjaon aikana DNA-polymeraasi kopioi kaiken DNA: nsa ja siirtää yhden kopion kullekin tytärsolulle. Vuonna 1955 Arthur Kornberg löydettiin DNA-polymeraasista E Colista. DNA-polymeraasin toiminta riippuu useista vaatimuksista; templaatti-DNA, Mg +2- ionit, kaikki neljä deoksinukleotidityyppiä (dATP, dTTP, dCTP ja d GTP) ja lyhyt RNA-sekvenssi (aluke). DNA: n synteesi tapahtuu 5'-3'-suuntaan DNA-polymeraasilla.
DNA-polymeraasit voidaan ryhmitellä seitsemään eri perheeseen: A, B, C, D, X, Y ja RT (käänteistranskriptaasi). Retrovirukset koodaavat RT: tä; epätavallinen DNA-polymeraasi, joka tarvitsee RNA-templaatin DNA-synteesiin. Prokaryooteista löytyy viittä erityyppistä DNA-polymeraasia eri rooleille DNA-replikaatiossa. DNA-polymeraasi 3 on vastuussa uuden DNA-juosteen polymeroinnista. DNA-polymeraasi 1 on vastuussa DNA: n korjaamisesta ja korjaamisesta. DNA-polymeraasit 2, 4 ja 5 vastaavat DNA: n korjaamisesta ja oikoluvusta. Eukaryooteissa on 15 erityyppistä DNA-polymeraasia. Niihin kuuluu viisi suurta perhettä.
Kuva 2: DNA-polymeraasi
DNA-polymeraaseja käytetään geenikloonauksessa, PCR: ssä, DNA-sekvensoinnissa, SNP-detektiossa, molekyylidiagnostiikassa jne. Taq-polymeraasi on eräänlainen DNA-polymeraasi, joka sietää korkeita lämpötiloja ja on käytettävissä DNA-synteesiin hajoamatta.
Mikä on ero Taq-polymeraasin ja DNA-polymeraasin välillä?
Erilainen artikkeli keskellä taulukkoa
Taq-polymeraasi vs DNA-polymeraasi |
|
| Taq-DNA-polymeraasi on entsyymi, joka luo DNA: ta. Se on termofiilien sisältämä termostabiili entsyymi | DNA-polymeraasi on entsyymi, joka helpottaa DNA: n replikaatiota ja löytyy sekä prokaryoottisista että eukaryoottisista organismeista. |
| Hajoaminen korkeissa lämpötiloissa | |
| Taq-polymeraasi on aktiivinen korkeissa lämpötiloissa. | DNA-polymeraasit hajoavat korkeissa lämpötiloissa denaturoivassa proteiinissa. |
| Käyttää | |
| Tätä käytetään laajalti PCR: ssä | Taq-polymeraasi korvasi alun perin PCR: ssä käytetyn kolin DNA-polymeraasin. |
Yhteenveto - Taq-polymeraasi vs. DNA-polymeraasi
DNA-polymeraasit ovat entsyymejä, jotka syntetisoivat DNA: ta deoksinukleotideista (DNA: n rakennuspalikoita), kun templaatti ja alukkeet ovat saatavilla. DNA-polymeraaseja tarvitaan solujen DNA: n monistamiseen ja siirtymiseen identtisiin tytärsoluihin solujakautumisen aikana. DNA-polymeraasit lisäävät uusia nukleotideja alukkeen 3'-päähän ja pidentävät uutta DNA-juosesynteesiä 5'-3'-suuntaan. Taq-DNA-polymeraasi on yksi DNA-polymeraasientsyymistä, joka on erittäin hyödyllinen polymeraasiketjureaktio (PCR) -menetelmässä DNA-monistuksessa. E. coli -DNA-polymeraasia 1 käytettiin aiemmin PCR: ssä, mutta kaupallinen Taq-polymeraasi syrjäytti sen johtuen alukkeen sitoutumisen korkeasta spesifisyydestä korotetuissa lämpötiloissa ja halutun tuotteen korkeamman saannon tuottamisesta vähemmän epäspesifisellä monistustuotteella. Tämä on ero Taq-polymeraasin ja DNA-polymeraasin välillä.
