Tärkein ero - kapillaarielektroforeesi vs geelielektroforeesi
Elektroforeesi on tekniikka, jota käytetään erottamaan biomolekyylit hiukkasten varauksen, hiukkaskoon ja hiukkasten muodon perusteella. Molekyylin siirtyminen, joka tunnetaan nimellä elektroforeettinen liikkuvuus, riippuu käytetyn polymeerin / geelin tyypistä, sen huokoskokosta, tarjotusta jännitteestä, käyntiaikasta ja pinnan ja tilavuuden suhteesta. On olemassa erityyppisiä elektroforeesitekniikoita käytetyn biomolekyylin tyypin perusteella. Ensimmäinen keksitty elektroforeesityyppi oli paperielektroforeesi, jossa nitroselluloosapaperia käytettiin väliaineena biomolekyylien erottamiseksi. Geelielektroforeesin periaate, jossa erilaisten huokoskokojen geelejä käytettiin biomolekyylien erottamiseen, keksittiin myöhemmin. Geelielektroforeesitekniikkaa muokattiin edelleen tekniikan tarkkuuden parantamiseksi, ja yksi tällainen modifikaatio on kapillaarielektroforeesi. Keskeinen ero kapillaarielektroforeesin ja geelielektroforeesin välillä on se, että geelielektroforeesi suoritetaan pystysuorassa tai vaakasuorassa tasossa käyttäen huokoskokoisen polymeerigeeliä, kun taas kapillaarielektroforeesi suoritetaan kapillaariputkessa polymeerinesteen tai geelin kanssa.
SISÄLLYS
1. Yleiskatsaus ja keskeinen ero
2. Mikä on geelielektroforeesi
3. Mikä on kapillaarielektroforeesi
4. Kapillaarielektroforeesin ja geelielektroforeesin yhtäläisyydet
5. Vertailu rinnakkain - kapillaarielektroforeesi vs geelielektroforeesi taulukkomuodossa
6. Yhteenveto
Mikä on geelielektroforeesi?
Geelielektroforeesi on tekniikka, jota käytetään pääasiassa nukleiinihappojen, proteiinien tai aminohappojen erottamiseen sen varauksen, koon ja muodon perusteella. Tässä tekniikassa käytetään fysikaalista geeliä, joka on polymeeriaine, erotusväliaineena. Yleisimmin käytetyt geelit ovat agaroosi (nukleiinihappojen erottamiseen) ja polyakryyliamidi (proteiinien erottamiseen). Geelielektroforeettinen laite sisältää geelivalualustan geelin valmistamiseksi, valukammat kaivojen valmistamiseksi, puskurisäiliö, positiiviset (anodi) ja negatiiviset (katodi) elektrodit sekä jännitesyöttöyksikkö. Negatiivisesti varautuneet molekyylit, kuten DNA tai RNA, siirtyvät katodista anodiin ja positiivisesti varautuneet molekyylit päinvastoin. Geeli valmistetaan vaatimuksen mukaisesti. Jos tarvitaan korkea resoluutio tai molekyylien erottaminen,tulisi valmistaa korkean konsentraation geeli, jolla on pienempi huokoskoko. Geelimatriisissa erotetut molekyylit havaitaan värjäystekniikan jälkeen. Erotetut molekyylit näkyvät vyöhykkeinä geelimatriisissa.
Kuva 01: Geelielektroforeesi
Geeli-elektroforeesia käytetään molekyylidiagnostiikassa, kuten DNA-sormenjälkien ottamisessa tietyn DNA / RNA-fragmentin tai proteiinin läsnäolon määrittämiseksi. Geelielektroforeesi määrittää myös uutetun biomolekyylinäytteen puhtauden. Geelielektroforeesi suoritetaan alustavana vaiheena in-hybridisaatiota ja hybridisaatiota varten ja vahvistavana analyysinä sekvensoinnin jälkeen.
Mikä on kapillaarielektroforeesi?
Kapillaarielektroforeesi on geelielektroforeesin muunnos, joka käyttää samaa erotusperiaatetta varauksen, molekyylin koon perusteella, mutta suoritetaan kapillaariputkessa joko geeliaineen tai nestemäisen polymeerin kanssa. Kapillaarit valmistetaan sulatetusta piidioksidista, ja jokaisen kapillaariputken sisähalkaisija on 50-100 μm ja pituus on 25-100 cm. Näytteet injektoidaan kapillaariputkeen, joka sisältää polymeerimateriaalin, ja ne erotetaan paljon nopeammin kuin tavanomainen geelielektroforeesi. Kapillaarijärjestelmä on hyvin suojattu eristysvaipan sisällä, joka suojaa näytettä lialta. Kapillaarit voidaan täyttää nestemäisillä polymeereillä, kuten hydroksietyyliselluloosalla, tai suuriresoluutioisilla geeleillä, kuten polyakryyliamidilla. Kapillaarielektroforeesi tarjoaa paremman resoluution; siten erottaminen on tarkempaa. Kapillaarielektroforeesissa käytetään automaattista detektorijärjestelmää spektrofotometrisen analyysin avulla. Tämä johtuu suuremmasta pinta-alan ja tilavuuden suhteesta.
Kuva 02: Kapillaarielektroforeesi
Kapillaarielektroforeesia käytetään tilanteissa, kuten rikosteknologiassa, joissa vaaditaan suurempaa tarkkuutta, eikä sitä yleisesti käytetä, koska se on kallista tekniikkaa.
Mitkä ovat kapillaarielektroforeesin ja geelielektroforeesin yhtäläisyydet?
- Molekyylien erottaminen molemmissa tekniikoissa perustuu molekyylin varaukseen ja kokoon.
- Molempia tekniikoita voidaan käyttää erottamaan sekä nukleiinihapot että proteiinit.
- Molempien tekniikoiden näytemäärä on sama.
- Molemmat tekniikat käyttävät puskuria erottamisen helpottamiseksi.
Mikä on ero kapillaarielektroforeesin ja geelielektroforeesin välillä?
Erilainen artikkeli keskellä taulukkoa
Kapillaarielektroforeesi vs geelielektroforeesi |
|
| Kapillaarielektroforeesi on tekniikka, joka erottaa biomolekyylit kapillaariputkesta käyttämällä nestemäistä tai geelipolymeeriväliainetta. | Geelielektroforeesi on tekniikka, joka erottaa biomolekyylit pysty- tai vaakatasossa käyttämällä polymeerigeeliväliainetta. |
| Erottaminen | |
| Kapillaarielektroforeesissa erotus tapahtuu kapillaariputken sisällä. | Geelielektroforeesissa erotus tapahtuu pysty- tai vaakatasossa. |
| Medium of separation | |
| Nestemäisiä polymeerejä, kuten hydroksietyyliselluloosaa, käytetään kapillaarielektroforeesissa. | Geelejä, joko agaroosia tai polyakryyliamidia, käytetään väliaineena geelielektroforeesissa. |
| Ristisidos | |
| Korkea resoluutio voidaan saada kapillaarielektroforeesilla. | Geeli-elektroforeesissa resoluutio on pieni. |
| Pinta-ala / tilavuus -suhde | |
| Pinnan ja tilavuuden suhde on korkea kapillaarielektroforeesissa. | Pinta-tilavuussuhde on alhainen geelielektroforeesissa. |
| Tunnistustekniikka | |
| Detektio tapahtuu automaattisilla spektrofotometrisillä ilmaisimilla kapillaarielektroforeesissa. | Värjäys ja havainnointi UV-läpivalaisimen kautta tehdään detektiotekniikoina geelielektroforeesissa. |
Yhteenveto - kapillaarielektroforeesi vs geelielektroforeesi
Molekyylidiagnostiikalla on tärkeä rooli tiedemaailmassa. DNA: n, RNA: n ja proteiinien tunnistaminen ja puhdistaminen ovat kriittisiä vaiheita diagnostisissa toimenpiteissä. Elektroforeesi on tekniikka, joka erottaa ja tunnistaa biomolekyylit sekä geelielektroforeesissa että paljon edistyneessä kapillaarigeelielektroforeesissa. Geelielektroforeesi suoritetaan pystysuorassa tai vaakasuorassa tasossa käyttämällä huokoskokoisen polymeerigeeliä, kun taas kapillaarielektroforeesi suoritetaan kapillaariputkessa polymeerinesteen tai geelin kanssa. Tämä on ero kapillaarielektroforeesin ja geelielektroforeesin välillä. Elektroforeesitekniikan valmistuttua biomolekyylit prosessoidaan edelleen korkeamman tason informaation saamiseksi hybridisaation tai tekniikoiden, kuten sormenjälkien, avulla.
Lataa PDF-versio kapillaarielektroforeesista vs. geelielektroforeesista
Voit ladata tämän artikkelin PDF-version ja käyttää sitä offline-tarkoituksiin lainausviestin mukaan. Lataa PDF-tiedosto täältä Ero geelielektroforeesin ja kapillaarielektroforeesin välillä.
