Tärkein ero - virtaussytometria vs. FACS
Soluteorian yhteydessä solut ovat kaikkien elävien organismien perusrakenteellinen ja toiminnallinen yksikkö. Solulajittelu on menetelmä, jota käytetään erottamaan eri solut fysiologisten ja morfologisten ominaisuuksien mukaan. Ne voivat olla solunsisäisiä tai solunulkoisia. DNA: n, RNA: n ja proteiinien vuorovaikutusta pidetään solunsisäisinä vuorovaikutteisina ominaisuuksina, kun taas muotoa, kokoa ja erilaisia pintaproteiineja pidetään solunulkoisina ominaisuuksina. Nykytieteessä solujen lajittelumenetelmät ovat johtaneet biologisten tutkimusten erilaisten tutkimusten ja myös uusien periaatteiden vahvistamiseen lääketieteellisen tutkimuksen avulla. Solulajittelu suoritetaan erilaisilla menetelmillä, jotka sisältävät sekä primitiivisiä vähemmän laitteita että edistyneitä teknisiä menetelmiä käyttämällä kehittyneitä koneita. Virtaussytometria, fluoresoiva aktivoitu solujen lajittelu (FACS), magneettinen solujen valinta ja yksittäisten solujen lajittelu ovat tärkeimmät käytetyt menetelmät. Virtaussytometria ja FACS kehitetään erottamaan solut niiden optisten ominaisuuksien mukaan. FACS on erikoistunut virtaussytometria. Virtaussytometria on menetelmä, jota käytetään heterogeenisen solupopulaation analysoinnissa solun eri molekyylien, koon ja tilavuuden mukaan, mikä mahdollistaa yksittäisten solujen tutkimuksen. FACS on prosessi, jossa solunäyteseos lajitellaan niiden valonsironta- ja fluoresenssiominaisuuksien mukaan kahteen tai useampaan astiaan. Tämä on keskeinen ero virtaussytometrian ja FACS: n välillä.
SISÄLLYS
1. Yleiskatsaus ja keskeinen ero
2. Mikä on virtaussytometria
3. Mikä on FACS
4. Virtaussytometrian ja FACS: n yhtäläisyydet
5. Vertailu vierekkäin - Virtaussytometria vs FACS taulukkomuodossa
6. Yhteenveto
Mikä on virtaussytometria?
Virtaussytometria on menetelmä, jota käytetään tutkimaan ja määrittämään solunsisäisten molekyylien ilmentyminen ja solun pinta sekä määrittelemään ja karakterisoimaan erilliset solutyypit. Sitä käytetään myös solutilavuuden ja solukoon määrittämisessä ja eristettyjen alaryhmien puhtauden arvioimiseksi. Tämä mahdollistaa yksittäisten solujen moniparametrisen arvioinnin suunnilleen samaan aikaan. Virtaussytometriaa käytetään mittaamaan fluoresenssin voimakkuutta, joka syntyy fluoresoivasti leimattujen vasta-aineiden ansiosta, jotka auttavat tunnistamaan assosioituneisiin soluihin sitoutuvia proteiineja tai ligandeja.
Kuva 01: Virtaussytometria
Yleensä virtaussytometria sisältää kolme alijärjestelmää pääasiassa. Ne ovat fluidit, elektroniikka ja optiikat. Virtaussytometriassa on saatavilla viisi pääkomponenttia, joita käytetään solujen lajittelussa. Ne ovat virtauskenno (nestevirta, jota käytetään kuljettamaan niitä ja kohdistamaan solut optista tunnistinprosessia varten), mittausjärjestelmä (voi olla erilainen järjestelmä, mukaan lukien elohopea- ja ksenonlamput, suuritehoiset vesijäähdytteiset tai pienitehoiset ilmajäähdytteiset laserit tai diodilaserit), ADC; Analogisesta digitaalimuunninjärjestelmään, vahvistinjärjestelmään ja tietokoneeseen analyysiä varten. Hankinta on prosessi, jolla tiedot kerätään näytteistä virtaussytometrillä. Tätä prosessia välittää tietokone, joka on kytketty virtaussytometriin. Tietokoneessa oleva ohjelmisto analysoi virtaussytometristä tietokoneelle syötettyä tietoa. Ohjelmistolla on myös kyky säätää kokeen parametreja säätämällä virtaussytometriä.
Mikä on FACS?
Virtaussytometrian yhteydessä fluoresenssiaktivoitu solujen lajittelu (FACS) on menetelmä, jota käytetään erottamaan ja lajittelemaan näyte biologisten solujen seoksesta. Solut erotetaan kahdesta tai useammasta säiliöstä. Lajittelumenetelmä perustuu solun fyysisiin piirteisiin, jotka sisältävät valon sironta- ja fluoresenssiominaisuudet. Tämä on tärkeä tieteellinen tekniikka, jota voidaan käyttää luotettavien kvantitatiivisten ja kvalitatiivisten tulosten saamiseksi kustakin solusta tulevista fluoresenssisignaaleista. FACS: n aikana aluksi ennalta saatu soluseos; suspensio ohjataan kapean nestevirran keskelle, joka virtaa nopeasti. Nestevirta on suunniteltu erottamaan suspensiossa olevat solut kunkin solun halkaisijan perusteella. Suspensiovirtaan kohdistetaan värähtelymekanismi, joka johtaa yksittäisten pisaroiden muodostumiseen.
Kuva 02: FACS
Järjestelmä on kalibroitu yhden pisaran muodostamiseksi yhdellä solulla. Juuri ennen pisaroiden muodostumista virtaussuspensio liikkuu pitkin fluoresenssin mittauslaitetta, joka havaitsee kullekin solulle ominaiset fluoresenssiominaisuudet. Pisaroiden muodostumiskohtaan sijoitetaan sähköinen latausrengas, joka aiheuttaa varauksen renkaaseen ennen fluoresenssin voimakkuuden mittaamista. Kun pisarat ovat muodostuneet suspensiovirrasta, pisara jää loukkuun, joka sitten siirtyy sähköstaattiseen taipumisjärjestelmään. Latauksen mukaan järjestelmä jakaa pisarat eri säiliöihin. Maksun käyttötapa vaihtelee FACS: ssä käytettyjen järjestelmien mukaan. FACS: ssä käytettävät laitteet tunnetaan fluoresenssiaktivoiduina solujen lajittelijoina.
Mikä on virtaussytometrian ja FACS: n samankaltaisuus?
Virtaussytometria ja FACS kehitetään erottamaan solut niiden optisten ominaisuuksien mukaan
Mikä on ero virtaussytometrian ja FACS: n välillä?
Erilainen artikkeli keskellä taulukkoa
Virtaussytometria vs. FACS |
|
Virtaussytometria on menetelmä, jota käytetään heterogeenisen solupopulaation analysoinnissa solun eri molekyylien, koon ja tilavuuden mukaan, mikä mahdollistaa yksittäisten solujen tutkimuksen. | FACS on prosessi, jossa solunäyteseos lajitellaan niiden valonsironta- ja fluoresenssiominaisuuksien mukaan kahteen tai useampaan astiaan. |
Yhteenveto - virtaussytometria vs. FACS
Solu on kaikkien elävien organismien perusrakenteellinen ja toiminnallinen yksikkö. Solulajittelu on prosessi, jolla solut eristetään ja erotetaan eri luokkiin niiden solunsisäisten ja solunulkoisten ominaisuuksien perusteella. Virtaussytometria ja FACS ovat kaksi tärkeää menetelmää solujen lajittelussa. Molemmat prosessit on kehitetty erottamaan solut niiden optisten ominaisuuksien mukaan. Virtaussytometria on menetelmä, jota käytetään heterogeenisen solupopulaation analysoinnissa solun eri molekyylien, koon ja tilavuuden mukaan, mikä mahdollistaa yksittäisten solujen tutkimuksen. FACS on prosessi, jossa solunäyteseos lajitellaan niiden valonsironta- ja fluoresenssiominaisuuksien mukaan kahteen tai useampaan astiaan. Tämä on ero virtaussytometrian ja FACS: n välillä.
Lataa virtaussytometrian ja FACS: n PDF-versio
Voit ladata tämän artikkelin PDF-version ja käyttää sitä offline-tarkoituksiin lainausviestin mukaan. Lataa PDF-versio täältä Virtaussytometrian ja FACS: n välinen ero