Tärkein ero - grammahra vs happo nopeasti
Bakteerit ovat hyvin pieniä mikro-organismeja. Ne ovat läpinäkyviä, ja niiden havaitseminen on vaikeaa elävissä ja tahrattomissa olosuhteissa. Siten kehitetään erilaisia värjäysmenetelmiä bakteerien havaitsemisen helpottamiseksi. Värjäystekniikoita on kolme päätyyppiä: yksinkertainen värjäys, differentiaalivärjäys ja rakenteellinen värjäys. Differentiaalivärjäys on tekniikka, jossa bakteerien erottamiseen käytetään useampaa kuin yhtä tahraa. Gram-tahra ja haponkestävä tahra tunnetaan yleisimmin differentiaalivärinä. Gram-värjäys on differentiaalivärjäystekniikka, joka erottaa bakteerit kahteen ryhmään, jotka tunnetaan nimellä gram-positiiviset bakteerit ja gram-negatiiviset bakteerit. Haponkestävä tahra on differentiaalivärjäys, jota käytetään haponkestävien organismien, kuten Mycobacterium, tunnistamiseen happamattomista organismeista. Tämä on tärkein ero Gram- ja Acid Fast -värjäysten välillä.
SISÄLLYS
1. Yleiskatsaus ja keskeinen ero
2. Mikä on grammahra
3. Mikä on haponkestävä
4. Samankaltaisuudet gram-tahran ja hapon nopeasti välillä
5. Vertailu vierekkäin - grammahrat vs. hapon nopeasti taulukkomuodossa
6. Yhteenveto
Mikä on Gram Stain?
Gram-tahra on tärkeä differentiaalivärjäystekniikka, jota käytetään bakteerien tunnistamiseen mikrobiologiassa. Tämän tekniikan otti käyttöön tanskalainen bakteriologi Hans Christian Gram vuonna 1884. Grammivärjäys luokittelee bakteerit kahteen pääryhmään nimeltä gram-positiiviset ja gram-negatiiviset, jotka ovat erittäin tärkeitä bakteerien luokittelussa ja tunnistamisessa. Mikrobiologit suorittavat gramma-värjäyksen alkuvaiheena bakteerien karakterisoinnissa tutkimustensa aikana.
Bakteerit ryhmitellään niiden soluseinän erojen perusteella. Grampositiiviset bakteerit koostuvat paksusta peptidoglykaanikerroksesta niiden soluseinässä, kun taas gram-negatiiviset bakteerit koostuvat ohuesta peptidoglykaanikerroksesta niiden soluseinässä. Grammivärjäyksen tulos perustuu soluseinän peptidoglykaanikerroksen paksuuden eroon.
Grammivärjäys suoritetaan käyttäen neljää erilaista reagenssia, nimittäin; ensisijainen tahra, peittävä, värinpoistoaine ja vastavärjäys. Kristalliviolettia ja safraniinia käytetään pää- ja vasta-tahroina, vastaavasti, grammoina jodia ja 95-prosenttista alkoholia vastaavasti peittävänä aineena ja värinpoistoaineena. Gramman tahran perusvaiheet ovat seuraavat;
- Bakteerivalmiste valmistetaan puhtaalle lasilevylle, kiinnitetään lämpöön ja jäähdytetään.
- Tahra valetaan kristalliviolettilla 1-2 minuutin ajan.
- Tahra huuhdellaan hitaasti juoksevalla vesijohtovedellä ylimääräisten tahrojen poistamiseksi.
- Grammaa jodia levitetään tahraan 1 minuutin ajan.
- Tahra huuhdellaan hitaasti juoksevalla vesijohtovedellä
- Tahra pestään 95-prosenttisella alkoholilla 2 - 5 sekunnin ajan ja huuhdellaan hitaasti juoksevalla vesijohtovedellä.
- Tahra on värjätty safraniinilla 1 minuutin ajan
- Tahra huuhdellaan hitaasti juoksevalla vesijohtovedellä, kuivataan ja tarkkaillaan mikroskoopilla.
Grammivärin lopussa gramnegatiiviset bakteerit havaitaan vaaleanpunaisella, kun taas gram-positiiviset bakteerit havaitaan purppuralla.
Kuva 01: Gram-negatiiviset ja gram-positiiviset bakteerit
Grammivärjäyksen tulos määräytyy niiden soluseinässä olevan peptidoglykaanikerroksen paksuuden mukaan. Värinpoistovaiheen aikana ensisijainen tahra ja peite poistetaan helposti gramnegatiivisista bakteereista ja niistä tulee värittömiä, koska niillä on ohut peptidoglykaanikerros. Ensisijainen tahra pysyy gram-positiivisissa bakteereissa, koska niillä on paksu peptidoglykaanikerros. Vastavärjäys ei ole tehokas gram-positiivisille bakteereille johtuen primäärivärjäytymisestä. Täten grammaa positiivisia bakteereita näkyy ensisijaisessa tahran värissä, ts. Violetissa värissä. Vastavärjäys tahraa gramnegatiiviset bakteerit, ja ne näkyvät poimivärinä, joka on safraniiniväri. Siksi bakteerit on helppo luokitella kahteen ryhmään gramman värjäyksen perusteella ja se on arvokas bakteerien erilaistumisessa ja tunnistamisessa.
Mikä on Acid Fast?
Haponkestävyys on tiettyjen bakteerien fysikaalinen ominaisuus, erityisesti niiden vastustuskyky happojen värjääntymiselle värjäysmenettelyjen aikana. Värjättyään nämä organismit vastustavat laimennettua happo- ja / tai etanolipohjaista värinpoistomenettelyä, jotka ovat yleisiä monissa värjäysprotokollissa. Siksi niille organismeille annetaan nimi 'happo nopeasti'. Tämä ominaisuus näkyy johtuen siitä, että soluseinissä on korkea vahamainen materiaali (mykolihapot). Tämä testi on kriittinen Mycobacterium tuberculosis -bakteerin tunnistamiseksi.
Kuva 2: Happamaiset nopeasti mykobakteerit
Tämän haponkestävän tahran kehitti Paul Ehrlich vuonna 1882. Ehrlichin happonopea tekniikka muokattiin Ziehl-Neelsenin toimesta ja sitä käytetään nyt useammin. Happohappovärjäysprosessi sisältää kolme erilaista reagenssia. Karbolifuschiinia käytetään ensisijaisena tahrana. Happoa sisältävää alkoholia käytetään värinpoistoaineena. Metyleenisinistä käytetään vastavärinä. Värjäysmenettely suoritetaan seuraavasti.
- Ensisijainen tahra (karbolifuksiini) levitetään lasilevyn kiinteään näytteeseen (kaikki solut värjätään punaisella).
- Lasi kuumennetaan höyryttämällä 5 minuuttia, mikä ajaa tahrat kennoihin kunnolla.
- Sitten lisätään värinpoistoliuos (tämä poistaa punaisen väriaineen kaikista soluista paitsi haponkestävistä bakteereista).
- Metyleenisininen lisätään vasta-tahrana (se värjää kaikki värjätyt bakteerisolut).
- Hapokkaat nopeasti bakteerit pysyvät punaisina, kun taas happamattomat nopeasti bakteerit värjäytyvät sinisenä.
Mitkä ovat gram-tahran ja hapon nopeasti yhtäläisyydet?
- Grammivärjäys ja Acid fast ovat kaksi erilaista värjäystekniikkaa.
- Molemmat tekniikat luokittelevat bakteerit kahteen ryhmään.
- Molemmissa tekniikoissa käytetään kahta tahraa ja yhtä värinpoistoa.
Mikä ero on grammaalilla ja nopeasti hapolla?
Erilainen artikkeli keskellä taulukkoa
Gram-tahra vs happo nopeasti |
|
| Gram-värjäys on differentiaalivärjäystekniikka, joka erottaa bakteerit kahteen ryhmään gram-positiivisia bakteereja ja gram-negatiivisia bakteereja. | Acid Fast -värjäys on differentiaalivärjäys, jota käytetään haponkestävien organismien tunnistamiseen hapottomista organismeista. |
| Ensisijainen tahra | |
| Kristallivioletti on yleisesti käytetty ensisijainen tahra gramma-värjäyksessä. | Karbolifuksiini on ensisijainen tahra, jota käytetään nopeasti hapossa. |
| Värinpoistoaine | |
| 95-prosenttista alkoholia käytetään värinpoistoaineena gramma-värjäyksessä. | Happoalkoholia käytetään värinpoistoaineena nopeasti hapossa. |
| Vastapelti | |
| Gram-värjäys käyttää safraniinia vastavärinä. | Happohappovärjäyksessä käytetään metyleenisinistä vastavärinä. |
| Havainto | |
| Gram-negatiiviset bakteerit havaitaan poimivärissä ja gram-positiiviset bakteerit purppuranvärisissä. | Acid Fast -bakteerit havaitaan punaisella ja happamattomat bakteerit sinisellä. |
Yhteenveto - grammahrat vs happamat nopeasti
Mikro-organismien visualisointi elävässä tilassa on vaikeaa. Siksi biologisia tahroja ja värjäysmenetelmiä käytetään laajasti niiden ominaisuuksien tutkimiseen. Differentiaalivärjäys on eräänlainen värjäystekniikka, jota käytetään bakteerien erottamiseen. Grammivärjäys ja haponkestävä tahra ovat kaksi erilaista värjäystekniikkaa. Gram-värjäys erottaa gram-negatiiviset bakteerit ja gram-positiiviset bakteerit niiden soluseinämän paksuuden perusteella. Hapanvärjäys erottaa haponkestävät bakteerit ei-haponkestävistä bakteereista soluseinän mykolihappopitoisuuden perusteella. Tämä on ero haponkestävän ja grammanvärin välillä.
Lataa PDF-versio Gram Stain vs Acid Fast
Voit ladata tämän artikkelin PDF-version ja käyttää sitä offline-tarkoituksiin lainausviestin mukaan. Lataa PDF-versio täältä Ero gram-tahran ja hapon nopea välillä.
