Tärkein ero - Nitroselluloosa vs nailonkalvo
Blottaus on tärkeä tekniikka DNA: n, RNA: n ja proteiinien spesifisten sekvenssien havaitsemiseksi niiden seoksista molekyylibiologiassa. Se tehdään käyttämällä blot-kalvoa. On olemassa erilaisia blottaustekniikoita, kuten pohjoinen, eteläinen ja läntinen blottaus. Oikean kalvon valinta blottausprosessille tulisi tehdä huolellisesti epäspesifisen sitoutumisen ja väärän havaitsemisen estämiseksi. Nitroselluloosa, nailon ja PVDF ovat yleisesti käytettyjä kalvoja blottaustekniikoissa. Niillä on erilaiset ominaisuudet. Keskeinen ero nitroselluloosan ja nailonkalvon välillä on se, että nitroselluloosakalvoilla on suuri proteiinin immobilisointipotentiaali, kun taas nailonkalvoilla on suuri nukleiinihappomobilisointipotentiaali. Molempia kalvotyyppejä käytetään kuitenkin usein blottaustekniikoissa.
SISÄLLYSLUETTELO
1. Yleiskatsaus ja tärkein ero
2. Mikä on nitroselluloosakalvo
3. Mikä on nailonkalvo
4. Vertailu rinnakkain - nitroselluloosa vs. nailonkalvo
5. Yhteenveto
Mikä on nitroselluloosakalvo?
Nitroselluloosakalvo on yleisesti käytetty kalvosuodatin nukleiinihappo- ja proteiinipuhdistustekniikoissa. Sillä on suuri proteiinisitoutumispotentiaali. Siksi nitroselluloosakalvoja käytetään laajalti Western blotting -tekniikassa. Nitroselluloosakalvot ovat yhteensopivia kaikkien hybridisaatiotekniikoiden kanssa ja niillä on ylivoimainen sitoutumiskyky ilman häiriöitä. Nitroselluloosakalvot ovat luonnostaan hydrofiilisiä. Ne tekevät hydrofiilisen vuorovaikutuksen molekyylien kanssa ja immobilisoivat ne tehokkaasti kalvolle. Kaupallisia nitroselluloosakalvoja on saatavana kahtena huokoskokona: 0,45 ja 0,2 pm.
Kuva 01: Nitroselluloosakalvo, jota käytetään western-blottauksessa
Mikä on nailonkalvo?
Nailonkalvo on toisen tyyppinen kaupallinen kalvo, jota käytetään blottaustekniikoissa. Sitä käytetään vaihtoehtoisesti nitroselluloosamembraanien kanssa etelä- ja pohjoisosissa. Nailonkalvot ovat ihanteellisia etelän blottaukseen kuin nitroselluloosa, koska niillä on suuri affiniteetti sitoutumiseen DNA: han. Nailomembraanien useiden ainutlaatuisten ominaisuuksien vuoksi tutkijat käyttävät yleensä nailonkalvoja etelä- ja pohjoispäällystykseen nitroselluloosakalvon sijasta. Nailonkalvoja suositellaan myös strippaamiseen ja uudelleenkäsittelyyn, toisin kuin nitroselluloosa.
Kuva 02: Nylonkalvo, jota käytetään eteläosassa
Mitä eroa on nitroselluloosalla ja nailonkalvolla?
Erilainen artikkeli keskellä taulukkoa
Nitroselluloosa vs nailonkalvo |
|
| Nitroselluloosakalvot ovat hauraita. | Nailonkalvot ovat vähemmän hauraita. |
| Käsittely | |
| Niitä on vaikea käsitellä. | Niitä on helppo käsitellä. |
| Uusinta | |
| Tukemattomia nitroselluloosakalvoja on vaikea uudistaa. | Uudelleenkäsittely on helppoa nailonkalvoilla. |
| Yhteensopivuus eri säilytysolosuhteiden kanssa | |
| Nitroselluloosakalvoilla on vähemmän lujuutta kestää erilaisia säilytysolosuhteita. | Nailonkalvot reagoivat vankemmin erilaisiin säilytysolosuhteisiin. |
| Käyttää | |
| Esiasennus vaaditaan. | Nylonkalvoille ei vaadita esikäsittelyä. |
| Hydrofiilinen luonto | |
| Nitroselluloosakalvot ovat luonteeltaan hydrofiilisiä, mutta ne ovat vähemmän hydrofiilisiä kuin nailonkalvot. | Ne ovat luonteeltaan erittäin hydrofiilisiä. |
| Liikkumattomuuspotentiaali | |
| Nitroselluloosakalvoilla on vähemmän affiniteettia nukleiinihappoihin. Mutta sillä on suuri affiniteetti proteiineihin. | Nailonkalvoilla on suuri sitoutumispotentiaali nukleiinihappojen kanssa kuin nitroselluloosakalvoilla. |
Yhteenveto - Nitroselluloosa vs nailonkalvo
Nitroselluloosa ja nailonkalvot ovat erityisiä levyjä, joita käytetään blottaustekniikassa nauhakuvion toistamiseksi geelillä. Ne mahdollistavat mahdollisuuden havaita tietty sekvenssi tai proteiini seoksista immobilisoimalla ne membraanille. Kun molekyylit ovat immobilisoituneet kalvolle, sitä voidaan käyttää substraattina hybridisaatioanalyysissä leimattujen koettimien kanssa. Nitroselluloosakalvoa käytetään yleisesti proteiinien havaitsemiseen Western-blottaustekniikassa, koska sillä on suuri sitoutumis affiniteetti proteiineihin. Nailonkalvoja käytetään usein etelä- ja pohjoisosissa. Tämä on ero nitroselluloosan ja nailonkalvon välillä.
